拉曼光譜應用挑戰和考慮因素

拉曼光譜雖有許多優點，但有時仍需要克服一些實際挑戰。 所有拉曼儀器上都會發生這些問題。 我們提供的解決方案可幫助您充分發揮拉曼系統的理想效能。

以下是一些實用的解決方案和建議。

1.拉曼效應相對較弱
雷尼紹的拉曼系統採用高效光學設計和超靈敏探測器。

2.强螢光背底會掩蓋拉曼譜帶

當使用多雷射系統時，您可切換至一個不同的激發波長。 例如，從可見光切換至近紅外雷射（如785 nm），通常可以减低螢光强度，從而有助於生成具有清晰拉曼譜帶的光譜。


3.許多樣品表面凹凸不平

過去，對不均勻樣品進行拉曼成像十分困難。 現在，借助LiveTrack實时聚焦追跡科技，雷尼紹顯微拉曼光譜儀可以在採集數據時自動保持聚焦。 您可以輕鬆研究化學成分和結構如何隨表面形貌而變化。

4.玻璃容器和顯微鏡蓋玻片會掩蓋樣品的拉曼譜帶

a.將玻璃顯微鏡蓋玻片替換為不銹鋼蓋玻片。

b.對於生物細胞，可以使用鏡面拋光不銹鋼、CaF2或MgF2顯微鏡蓋玻片。

c.用石英代替標準玻璃容器，石英在785 nm波長下產生的背底低於標準玻璃。

5.容器和襯底也會影響光譜

您可以控制共焦顯微拉曼光譜儀和拉曼分析儀的共焦程度。 將高數值孔徑（N.A.）顯微鏡物鏡與高度共焦儀器設定相結合，可大幅减少採樣體積。 這有助於消除來自襯底或容器物質的任何不需要的背底數據。

在分析透明容器中的塊狀樣品時，您可以使用低數值孔徑鏡頭聚焦到容器中。 這是增强目標物質的拉曼訊號，並儘量減少容器對光譜的干擾的另一種方法。

6.高雷射功率會損壞樣品

我們使用雷射產生拉曼散射。 拉曼訊號與雷射功率成正比，囙此功率越大，通常訊號越强。

然而，所有樣品都有一個雷射功率密度閾值，一旦超過該閾值，則可能會導致樣品發生結構或化學變化。 我們的解決方案如下：

a.高通量光譜儀設計； 您可以用非常低的雷射功率產生强拉曼訊號。

b.雷射功率由軟件控制且可重複。 這樣，您就可以確定您的樣品不會發生變化。

c.使用線聚焦模式將入射雷射功率分散到較大樣品區域上。 使用顯微拉曼光譜儀，RA802藥物分析儀和RA816生物分析儀均可實現這種解決方案。

7.軟件自動去除宇宙射線

宇宙射線是來自地球大氣層以外的高能粒子。 如果宇宙射線在資料獲取過程中影響探測器，光譜中就會出現高强度尖峰。 大面積拉曼影像中通常包含數千個宇宙射線偽影。

WiRE軟件可以完全自動從包含多達5000萬個光譜的大面積拉曼影像中去除宇宙射線。 然後我們可以自動運行資料分析工作流程，以生成可靠的結果。

拉曼影像的空間分辯率


以下因素决定著顯微拉曼光譜儀的空間分辯率：

•雷射光斑尺寸

這是物鏡數值孔徑（NA）和雷射波長的函數。 簡而言之，較高的數值孔徑和較短的波長會產生較小的光斑尺寸。

•樣品上光譜採集點之間的間距（採樣）

這是樣品臺的功能。 雷尼紹的MS30高速光柵尺迴響平臺具有較大的行程範圍和低至50 nm的小步長。 這些步長小於受繞射限制的最小雷射光斑尺寸。

•光譜儀中光學器件的放大倍數及CCD像元尺寸

它最終受限於光的固有波形本性，達到略小於微米級的水准。